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HIV Ag/Ac ELISA 4ª GeneraciónEnsayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección simultánea del antígeno p24 de HIV-1 y de anticuerpos anti HIV-1 y anti HIV-2 en suero o plasma.UTILIDAD CLÍNICA Los inmunoensayos convencionales para la determinación de anticuerpos contra el VIH pueden ser ineficientes para detectar infecciones primarias debido a que la seroconversión ocurre a partir de la 3º-4º semana post infección. Los ensayos de 4º generación detectan simultáneamente antígenos y anticuerpos del VIH, permiten la detección temprana de la infección combinando simplicidad, sensibilidad y precisión en una sola prueba. PRINCIPIO DEL MÉTODO Los pocillos de la policubeta están recubiertos con proteínas recombinantes y péptidos sintéticos de HIV-1 y HIV-2 y anticuerpos monoclonales anti-p24. La muestra se incuba en los pocillos, si la misma contiene p24 y/o anticuerpos contra HIV-1 o HIV-2 se unirán a los antígenos y/o anticuerpos del pocillo. El material no unido es removido por lavado. En el paso siguiente se agrega el Conjugado 1 que contiene anticuerpos y antígenos marcados con biotina que se unirán a los antígenos/anticuerpos si están presentes en la muestra. Luego se agrega el Conjugado 2 (peroxidasa conjugada a estreptavidina) que se unirá al Conjugado 1. El conjugado no unido se remueve por lavado. A continuación se agrega una solución conteniendo tetrametilbencidina (TMB) y peróxido de hidrógeno. Las muestras reactivas desarrollan color azul que vira al amarillo cuando la reacción se detiene con ácido sulfúrico (Stopper). VENTAJAS • Detección simultánea de antígenos y anticuerpos específicos del VIH • Dos determinaciones en una • Pocillos recortables individualmente • Cambio de color por adición de muestra • Reactivos coloreados. • Sistema Biotina-Estreptavidina-Peroxidasa • Anticuerpo Anti-p24 humanizado • Excelente contraste entre muestras positivas y negativas COMPOSICIÓN DEL KIT • Policubeta sensibilizada: Policubeta de 96 pocillos recubiertos con proteínas recombinantes y péptidos sintéticos de HIV-1 y HIV-2 y anticuerpos monoclonales humanizados anti-p24. • Diluyente de Muestra: Buffer Tris 0,02 M conteniendo proteínas bovinas, cloruro de sodio y agente tensioactivo, pH 7,2, color azul. • Conjugado 1: Solución lista para usar conteniendo antígenos recombinantes y péptidos sintéticos de HIV-1 y HIV-2 y anticuerpos monoclonales humanizados anti-p24 biotinilados en buffer fosfato 10 mM con proteínas bovinas, cloruro de sodio y agente tensioactivo, pH 7,2. • Conjugado 2 concentrado: Estreptavidina conjugada con peroxidasa, color naranja. • Diluyente de Conjugado 2: Buffer fosfato 10 mM con proteínas bovinas, cloruro de sodio y agente tensioactivo, pH 7,2. • TMB: Solución de tetrametilbencidina 36 mM en dimetilsulfóxido (DMSO) 100%, (100x). • Diluyente de TMB: Buffer citrato 40 mM y peróxido de hidrógeno 1,27 mM, pH 4,3. • Stopper: Ácido sulfúrico 1 M. • Buffer de Lavado concentrado: Buffer fosfato 250 mM, cloruro de sodio 3,45 M y agente tensioactivo, (25x), pH 6,4. • Control Positivo: Suero humano inactivado, conteniendo anticuerpos anti-HIV, color rojo. • Control Positivo p24: Solución de antígeno p24 de HIV-1 en buffer fosfato 10 mM con proteínas bovinas, cloruro de sodio, y agente tensioactivo, pH 7,2. • Control Negativo: Suero humano normal no reactivo, inactivado, color amarillo. PRESENTACIÓN Código: 1723451 96 test por kit |
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